中药复方成分复杂，作用靶点及调控通路众多。传统研究多围绕成分鉴定、网络预测及整体药效展开，对于复方的作用靶点、活性分子配伍协同的研究仍然缺少优秀的技术路线与方法。

为解决中药复方研究的痛点问题，达吉特构建了复方层面的“从靶到药”和“从药到靶”的两条创新研究体系为深入揭示复方的药效物质基础与作用机制，做出符合中医理论指导的科研成果提供了强有力的技术支撑。

技术路线1：复方靶点+SPR中药活性分子垂钓

如何将复方作为一个整体进行筛靶，是中医药研究领域长久以来频繁讨论和密切关注的技术难题。Iso-TOP-ABPP等技术的出现为该研究能够顺利开展提供了新方法。该技术不需要对复方中上百种天然产物进行化学修饰，将这些天然产物作为整体与半胱氨酸高亲和探针DBIA进行竞争，通过对DBIA探针结合靶点谱的分析，就可以获得中药复方能够结合的蛋白靶点谱乃至能够共价结合的氨基酸位点信息。在此基础上，分析出能够与疾病密切相关的靶点蛋白，并以该蛋白作为疾病发生的核心基础对复方中的活性分子进行反向垂钓。最终，既为复方找到了蛋白靶点，也筛选出了能够调控该疾病核心靶点最优秀的活性分子。具体实验流程如下：

（1）高标准中药复方成分鉴定丨复方中有什么小分子？

基于LC-MS/MS高分辨质谱平台，结合自主构建的5000+种中药来源小分子标准品数据库，对中药复方中的化学成分进行系统鉴定，明确复方物质基础。

（2）复方入血/入组织成分分析丨复方中有哪些成分能真正进入体内？

基于原方鉴定结果，解析进入血液循环及靶组织中的中药复方原型成分与代谢产物，进一步锁定具有体内暴露基础的候选活性分子。

（3）isoTOP—ABPP技术筛选复方结合靶点丨复方作用在哪些靶点蛋白？

isoTOP—ABPP技术基于可结合活性半胱氨酸的DBIA探针，在活细胞中加入中药复方，与DBIA探针竞争半胱氨酸结合位点，从而实现复方结合靶点的鉴定。

（4）SPR中药活性分子垂钓丨复方中的哪些小分子能够与该靶点结合？

针对筛选出来的复方结合靶点，可利用SPR分子垂钓结合质谱鉴定技术，在中药复方中富集并鉴定能够与靶点蛋白结合的活性分子。

（5）多浓度SPR验证丨筛选到的活性分子是否能够与靶点直接结合？

通过多浓度SPR一对一检测结合动力学参数，对筛选到的活性分子与靶点蛋白的互作关系进行进一步验证。

       当然，为保证上述技术路线的稳定实施，需要有大量的技术投入和储备。从高标准的复方成分鉴定，到isoTOP-ABPP活细胞水平筛靶，再到SPR中药复方活性分子垂钓与鉴定，达吉特已经跑通了整条技术路线，可以提供专业的技术服务。

技术路线2：复方分子协同+核心靶点深入机理研究

在技术路线1中获得的高标准复方鉴定数据，可以成为技术路线2的复方鉴定共用数据，不需要重复投入科研经费。在技术路线2中，我们重点关注的是中药复方中天然产物之间的分子协调现象，并通过发现分子协调的靶点，彻底揭开中药分子药对的药效物质基础。具体流程如下：

（1）高标准中药复方成分鉴定丨复方中有什么小分子？

复用已有的复方成分鉴定数据，建立候选活性分子集合。

（2）复方入血/入组织成分分析丨复方中有哪些成分能真正进入体内？

将入血入组织成分作为后续网药分析及成分筛选的重点关注分子。

（3）网络药理学丨复方及活性成分的潜在靶点与通路有哪些？

基于网络药理学构建“复方—成分—疾病—靶点”的关联网络，为后续的机制研究提供候选靶点与通路。

（4）活性分子协同分析丨复方中哪些成分能够发挥协同作用？

利用高内涵等技术在细胞模型中，开展复方入血/入组织成分组合筛选，结合协同算法评价组合效应，发现具有协同作用的活性药对。

（5）分子药对靶点筛选丨筛选到的协同药对作用于哪些靶点？

针对筛选到的协同药对，开展20K人类蛋白组芯片、DARTS、ABPP等靶点筛选实验，寻找与协同表型相关的关键靶点蛋白，与网络药理学结果进行综合分析，以进一步开展深入机制研究。

您的复方研究，还可以再向前拓展一步

在达吉特的中药复方高阶研究方案中，一条路径从靶点出发寻找复方中的活性分子，建立“中药复方—靶点蛋白—活性成分”的关联网络；另一条路径从协同药效出发，寻找分子药对及其核心靶点，解析复方多成分配伍协同的作用基础。达吉特的研究策略可以让传统的复方研究不仅仅止步于网络药理学和分子对接，还可以向前继续延伸，回答的问题也从“复方中有哪些分子”等基础问题，进一步拓展到“复方中有哪些活性分子？复方通过调控哪些靶点起作用？活性分子之间如何协同？”等更深层次的问题，进而推动中药复方研究走上既考虑中医理论，又结合现代化实验技术的新路径。

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