表面等离子共振SPR是一种基于光学信号变化实时监测分子间相互作用的检测技术。基于SPR的技术原理，可针对特定靶点蛋白在中药复方中垂钓与之结合的活性成分。首先将目标蛋白固定与SPR芯片表面，中药复方样品单浓度进样，通过反复循环上样，富集中药复方中与靶蛋白结合的分子；随后将结合成分进行洗脱回收。最后通过超高效液相色谱-高分辨质谱联用法对回收的洗脱液进行成分鉴定，结合标准品比对，即可明确复方中与靶点蛋白结合的活性成分。基于SPR的分子垂钓方法是一种灵敏、高效、方便的中药复方活性成分筛选系统。

|  技术优势

• 灵敏：灵敏高效地捕获并富集中药复方中与靶点蛋白发生结合的活性成分；

• 准确：通过高分辨质谱鉴定与标准品比对，可实现靶向结合成分的精准鉴定；

• 创新：以靶点蛋白为导向，筛选具有靶点直接结合能力的成分，为中药活性物质发现提供创新技术路径。

|  研究案例

研究案例1：基于SPR分子垂钓技术筛选川楝子、穿心莲及川芎中靶向CXCR4的活性分子

CXCR4作为重要的膜蛋白治疗靶点，在肿瘤转移和炎症中发挥关键作用。该研究利用慢病毒颗粒转载表达CXCR4后，偶联至SPR芯片表面，从川楝子、穿心莲及川芎三种中药材提取物中垂钓能够与CXCR4结合的活性成分。经高分辨质谱鉴定与标准品比对发现，洋川芎内酯I能够直接结合CXCR4，有望成为新型的先导靶向化合物。

研究案例2：基于SPR分子垂钓技术筛选白芍中靶向TNF-R1的活性分子

TNF-R1作为TNF-α介导炎症信号通路的关键受体，在慢性炎症、自身免疫疾病及肿瘤发生发展中发挥重要作用，是炎症相关疾病药物研发的重要靶点。该研究在具有抗炎功效的中药白芍提取物垂钓与之结合的活性成分。随后，经 UPLC-QTOF/MS与标准品比对发现，芍药苷和丹皮酚是白芍中的TNF-R1结合成分。经湿实验验证，二者能够靶向结合TNF-R1，从而抑制TNF-α，发挥抗炎作用。

|  参考文献

1. Chen L, Lv D, Wang S, et al. Surface Plasmon Resonance-Based Membrane Protein-Targeted Active Ingredients Recognition Strategy: Construction and Implementation in Ligand Screening from Herbal Medicines. Anal Chem. 2020;92(5):3972-3980. doi:10.1021/acs.analchem.9b05479

2. Lv D, Xu J, Qi M, et al. A strategy of screening and binding analysis of bioactive components from traditional Chinese medicine based on surface plasmon resonance biosensor. J Pharm Anal. 2022;12(3):500-508. doi:10.1016/j.jpha.2021.11.006

|  相关产品