什么在筛靶之后还要进行验证?采用什么方法验证?
分类:技术解答 发布时间:2025-05-27 11:32:05

因为靶点筛选实验都是高通量筛选,所以可能会有一定的假阳性结果,后续需要进行靶点验证实验,验证该蛋白是否与小分子存在直接相互作用。首先推荐SPR表面等离子共振技术,该技术是检测分子互作及亲和力的主流技术,也是目前唯一受到FDA认可的金标准技术,能够绘制出两种分析物相互作用的SPR分子互作动力学曲线,计算出KD稳态与平衡常数,说明小分子药物是否与靶蛋白直接结合。除此之外,也需要使用其他技术手段进行验证,比如pull down/DARTS/CETSA+WB等,通过多个实验确认证实小分子和靶点蛋白的相互作用。