将小分子进行生物素标记后处理活细胞,加入SPIDER 系统,在结核分枝杆菌类泛素化连接酶PafA的催化下,PupE 的C末端与膜蛋白表面的赖氨酸残基共价相连,形成类泛素连接反应,进一步,通过LC-MS分析出小分子的潜在靶点蛋白。
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技术优势
在活细胞水平上进行靶点筛选
共价结合形成类泛素化连接反应
更适合膜蛋白的靶点筛选
参考文献
Jiang HW, Chen H, Zheng YX, et al. Specific pupylation as IDEntity reporter (SPIDER) for the identification of protein-biomolecule interactions. Sci China Life Sci. 2023;66(8):1869-1887. Published 2023 Apr 14.(上海交通大学)IF=8.0